CROP TILLING

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                                图1. 本水稻TILLING平台的工作流程
         1)中花11号种子经EMS诱变产生M0代种子
         2)种植M0代种子产生M1诱变群体
         3)收集并种植M1代植株主分蘖上的M2代种子产生M2代诱变群体
          4)单株取材M2代植株叶片进行基因组DNA提取、浓度均一化和样品池制备
         5)单株收集用于基因组DNA提取的M2代植株上的M3代种子
         6)确定目的基因并进行基因特异性引物设计
         7)PCR
         8)将PCR产物进行加热变性-缓慢复性以形成异源双链并进行CEL I酶切
          9)将CEL I酶切产物用Fragment Analyzer™ 自动毛细管电泳系统进行分离
          10)数据分析得到含有点突变的混合样品池样品
         11)拆分混合样品池得到含有点突变样品并测序鉴定点突变