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引物设计有特别要求吗？

引物设计的基本原则是能够特异地扩增目的片段。通常引物长度设计为24-27个碱基，退火温度在60度左右。该目的片段的GC含量不低于48%左右，片段长度不低于800bp。如遇特殊的基因结构，可不考虑此对上述参数可予以调整，那么但是得到的突变体数量将无法得到保证。